အကောင်းဆုံး အာရုံစူးစိုက်မှုကို ဘယ်လိုဆုံးဖြတ်မလဲ။
inducer IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside) အတွက်၊ ပါဝင်မှု မြင့်လေ ပိုကောင်းလေဖြစ်သည်။ အကောင်းဆုံး ပါဝင်မှုသည် သီးခြား စမ်းသပ်မှု အခြေအနေများနှင့် လိုချင်သော induction effect ပေါ်တွင် မူတည်သည်။
ယေဘုယျအားဖြင့် IPTG ၏ ပါဝင်မှုကို 0.1-1 mM အတိုင်းအတာအတွင်း အသုံးပြုသည်။ ပါဝင်မှုနည်းခြင်းသည် ဆဲလ်ကြီးထွားမှုအပေါ် ဆိုးကျိုးများကို လျှော့ချနိုင်ပြီး ပစ်မှတ်ပရိုတင်းများ၏ အလွန်အကျွံဖော်ပြမှုကြောင့် ဆိုက်တိုအဆိပ်သင့်မှုကို လျှော့ချနိုင်သည်။ ပါဝင်မှုမြင့်ခြင်းသည် ဆဲလ်ဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာ ဝန်ထုပ်ဝန်ပိုးကို အလွန်အကျွံဖြစ်စေပြီး ဆဲလ်ကြီးထွားမှုနှင့် ဖော်ပြမှုထိရောက်မှုကို ထိခိုက်စေနိုင်သည်။
အကောင်းဆုံးအာရုံစူးစိုက်မှုကို ဆုံးဖြတ်ရန်နည်းလမ်းမှာ မတူညီသောအာရုံစူးစိုက်မှုများတွင် IPTG induction စမ်းသပ်မှုများကို ပြုလုပ်ခြင်းဖြင့် ပစ်မှတ်ပရိုတင်း၏ expression level ကို အကဲဖြတ်ခြင်းဖြစ်သည်။ IPTG အာရုံစူးစိုက်မှုအမျိုးမျိုး (ဥပမာ 0.1 mM၊ 0.5 mM၊ 1 mM စသည်) ကို အသုံးပြု၍ အသေးစားယဉ်ကျေးမှုစစ်ဆေးမှုများကို ပြုလုပ်နိုင်ပြီး မတူညီသောအာရုံစူးစိုက်မှုများတွင် expression effect ကို target ပရိုတင်း၏ expression level ကို ထောက်လှမ်းခြင်းဖြင့် အကဲဖြတ်နိုင်သည် (ဥပမာ Western blot သို့မဟုတ် fluorescence detection)။ စမ်းသပ်မှုရလဒ်များအရ အကောင်းဆုံး expression effect ရှိသော အာရုံစူးစိုက်မှုကို အကောင်းဆုံးအာရုံစူးစိုက်မှုအဖြစ် ရွေးချယ်ခဲ့သည်။
ထို့အပြင်၊ အလားတူစမ်းသပ်မှုအခြေအနေများအောက်တွင် အသုံးများသော IPTG ပါဝင်မှုအပိုင်းအခြားကို နားလည်ရန် သက်ဆိုင်ရာစာပေများ သို့မဟုတ် အခြားဓာတ်ခွဲခန်းများ၏ အတွေ့အကြုံများကိုလည်း ရည်ညွှန်းနိုင်ပြီး စမ်းသပ်မှုလိုအပ်ချက်များအလိုက် အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင် လုပ်ဆောင်ပြီး ချိန်ညှိနိုင်သည်။
အကောင်းဆုံး செறியாள்သည် မတူညီသော ဖော်ပြချက်စနစ်များ၊ ပစ်မှတ်ပရိုတင်းများနှင့် စမ်းသပ်မှုအခြေအနေများပေါ် မူတည်၍ ကွဲပြားနိုင်သောကြောင့် ဖြစ်ရပ်တစ်ခုချင်းစီအလိုက် အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင် ပြုလုပ်သင့်ကြောင်း မှတ်သားထားရန် အရေးကြီးပါသည်။
ပို့စ်တင်ချိန်: ၂၀၂၃ ခုနှစ်၊ စက်တင်ဘာလ ၂၈ ရက်